色谱柱 BioMix SEC-300

参考信息

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高分辨率及高回收率兼容大多数水性缓冲液适宜筛选不同表达的细胞培养克隆抗体、监测其纯化和评价药物纯度

　　赛分科技BioMix SEC-300色谱柱填料基质为孔径300 ?、粒径3 μm的高纯度、高机械稳定性的球形二氧化硅颗粒，表面键合一层均一、亲水、中性的纳米厚膜。专有的表面技术能较好地控制薄膜形成的化学过程，从而产生高的柱间重现性。BioMix SEC-300色谱柱能够对多种样品（如双特异性抗体、疏水性样品等）实现高分辨率和高回收率的分离。高分辨率

　　Biomix在分离双抗错配体方面表现出了强大的能力，峰分辨率其他方法无法比拟，可以将目标双抗与同源二聚体、半抗以及轻链或重链错配体进行较好的分离。该方法可以定量检测即使是低丰度存在的抗体，为筛选细胞培养克隆体的不同表达、监测其纯化和评价药物纯度都提供了新的工具。

图1. 双抗和其他次要形式抗体（含同二聚体和错配抗体）分离

色谱柱: BioMix SEC-300 (3 μm，7.8×300mm)

流动相: PBS，pH 7.4

流速: 0.5 mL/min

检测波长: UV 214 nm & 280 nm

图2. BioMix SEC-300分离出双抗错配

色谱柱: BioMix SEC-300 (3 μm，300?，7.8×300mm)

进样体积: 100 μL

流速: 0.5 mL/min

检测波长: UV 280 nm

图3. 双抗的不同细胞培养样品分析色谱柱: BioMix-300 (3 μm，7.8*300mm)

流动相: PBS，pH 7.4

流速: 0.5 mL/min

检测波长: UV 214 nm & 280 nm

以Biomix对同一双抗的三种主要类型细胞培养样品做分析，观察得到：在1型样品（图A）中，存在大量各种半抗；双抗的组装效率不高，双抗含量低至30%。并且能观察到相当数量的非目标产物，包括错配的全聚体和半抗（重链-轻链错配）。在2型样品(图B)中，主要形式是所需的双抗，还有一些单抗A的半抗，以及大量的单抗A同源二聚体和一些一起洗脱的错配体。然而，几乎没有产生单抗B的半抗。3型样品（图C）与2型样品相似，只是单抗A的同源二聚体占比要低得多，且未见错配体。

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